DNA損傷分析試劑盒為基礎研究和工業應用提供了強大的工具。這種創新的方法是基于在一個長(8.2-8.8 kb)的線粒體DNA片段上進行30個周期的定量PCR,然后使用實時PCR進行定量。
整套試劑盒可用于人、大鼠或小鼠的血液、細胞或組織。由于缺失和鏈斷裂造成的DNA損傷可以用此試劑盒檢測,使用微板格式的DNA分離技術,該試劑盒可以很容易地用于高通量格式。在這方面,Detroit R&D研發分析是一個很有前途的工具,因為快速,操作簡單,只需要少量的測試物質。
【Products】
【Cat# DD2H】: Real-Time PCR DNA Quantitation following QPCR for human
【Cat# DD2M】: Real-Time PCR DNA Quantitation following QPCR for mouse
【Cat# DD2R】: Real-Time PCR DNA Quantitation following QPCR for rat
DNA損傷分析試劑盒,用于在體內和體外測量8.8 kb線粒體DNA的損傷,通過QPCR分析,對復制的DNA進行實時PCR定量:
試劑盒包含DNA聚合酶、QPCR引物和dNTPs,real-time PCR的引物,以及用于real-time PCR定量的8.8kb real-time PCR標準品(不包括SYBR Green master mix for real-time PCR)。重復分析20個樣品(45個反應)。
左:實時PCR標準品擴增圖;右:實時PCR分析8.8kb線粒體DNA的標準曲線
【Related Products】
【Catalog # MCN1, MCN2, MCN3】 :Mitochondrial DNA Copy Number Kits
這些是基于定量PCR的試劑盒,用于測量人、大鼠或小鼠的線粒體DNA拷貝數。該試劑盒包括小鼠、人或大鼠的引物,可產生200 kb的線粒體DNA序列。此外,該試劑盒還包括核DNA(b-actin)序列的引物,標準曲線的內控物,含有Taq DNA聚合酶,dNTPs,MgCl2和緩沖液的反應混合物和測定板。
【相關應用】
LQPCR線粒體DNA損傷測定
使用表達DNA損傷敏感cox -2的XPA細胞進行臨床前候選藥物篩選
候選藥物通常被生物轉化為有活性的毒性代謝物,通過COX-2過氧化物酶活性破壞DNA。Comet和OxyDNA檢測分別檢測斷裂DNA和氧化DNA。然而,候選藥物形成的數千種不同的DNAs,無法用這種方法檢測到。Detroit R&D開發了一種LQPCR檢測方法,用于檢測數千種不同候選藥物引起的DNA損傷修復缺陷,著色性干皮病A組(XPA)人成纖維細胞系致敏DNA損傷發生的候選藥物。表達COX-2的XPA細胞具有較強的COX-2催化活性。
LQPCR DNA損傷檢測的應用實例:
用一種已知的COX-2激活的DNA損傷劑benzo(a)pyrene-7,8-dihydrodiol (BPD),COX-2過氧化物酶活性的底物- tert-butyl hydroperoxide (t-BOOH)處理表達COX-2的XPA細胞。采用LQPCR分析DNA損傷。如上圖柱狀圖所示,COX-2依賴性DNA損傷在BPD治療后顯著增加。
除了細胞系統外,LQPCR DNA損傷測定還可用于新鮮或冷凍的組織或血液標本。因此,這種LQPCR DNA損傷試驗不僅可以用于篩選細胞內的候選藥物,也可以用于篩選體內的候選藥物。
Detroit R&D公司位于美國,研發實驗室和辦公室位于密歇根州底特律市。由Dr. Hyesook Kim創立于1997年,通過領先的技術,致力于贏得科研工作者的絕對信任,提供優質,最高質量的產品。Detroit R&D研發一直穩步建立自己作為一個世界范圍內的新型診斷和藥物篩選產品的來源。
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